Gen Resistensi Karbapenem (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nama Produk
Kit Deteksi Gen Resistensi Karbapenem HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR Fluoresensi)
Epidemiologi
Antibiotik karbapenem adalah antibiotik β-laktam atipikal dengan spektrum antibakteri terluas dan aktivitas antibakteri terkuat. Karena stabilitasnya terhadap β-laktamase dan toksisitasnya yang rendah, antibiotik ini telah menjadi salah satu obat antibakteri terpenting untuk pengobatan infeksi bakteri berat. Karbapenem sangat stabil terhadap β-laktamase spektrum luas (ESBL) yang dimediasi plasmid, kromosom, dan sefalosporinase (enzim AmpC) yang dimediasi plasmid.
Saluran
| PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| KELUARGA | PENTING | VIM |
| VIC/HEX | Pengendalian Internal | Pengendalian Internal |
| Tahun 5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Parameter Teknis
| Penyimpanan | ≤-18℃ |
| Masa simpan | 12 bulan |
| Jenis Spesimen | Dahak, koloni murni, usap rektal |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103CFU/mL |
| Kekhususan | a) Kit ini mendeteksi referensi negatif standar perusahaan, dan hasilnya memenuhi persyaratan referensi terkait. b) Hasil uji reaktivitas silang menunjukkan bahwa kit ini tidak memiliki reaksi silang dengan patogen pernapasan lainnya, seperti Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, adenovirus pernapasan, Enterococcus, atau sampel yang mengandung gen resistensi obat lainnya seperti CTX, mecA, SME, SHV, TEM, dll. c) Anti-interferensi: Mucin, Minocycline, Gentamicin, Clindamycin, Imipenem, Cefoperazone, Meropenem, Ciprofloxacin Hydrochloride, Levofloxacin, Clavulanic acid, Roxithromycin dipilih untuk uji interferensi, dan hasilnya menunjukkan bahwa zat pengganggu yang disebutkan di atas tidak memiliki reaksi interferensi terhadap deteksi gen resistensi karbapenem KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM, dan IMP. |
| Instrumen yang Berlaku | Sistem PCR Real-Time Applied Biosystems 7500 Sistem PCR Real-Time QuantStudio®5 Sistem PCR Real-Time SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Sistem PCR Real-Time LightCycler®480 Sistem Deteksi PCR Real-Time LineGene 9600 Plus (FQD-96A,HangzhouTeknologi bioteknologi) MA-6000 Real-Time Quantitative Thermal Cycler (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Sistem PCR Real-Time BioRad CFX96 Sistem PCR Real-Time BioRad CFX Opus 96 |
Alur Kerja
Opsi 1.
Reagen ekstraksi yang direkomendasikan: Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-301)9-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (yang dapat digunakan dengan Ekstraktor Asam Nukleat Otomatis Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) oleh Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Tambahkan 200μL larutan garam fisiologis ke endapan talus. Langkah selanjutnya harus mengikuti petunjuk ekstraksi, dan volume elusi yang disarankan adalah100μL.
Opsi 2.
Reagen ekstraksi yang direkomendasikan: Reagen Ekstraksi atau Pemurnian Asam Nukleat (YDP302) dari Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Ekstraksi harus dimulai sesuai dengan langkah 2 dari petunjuk penggunaan (tambahkan 200μL buffer GA ke endapan talus, dan kocok hingga talus tersuspensi sepenuhnya). Gunakan air bebas RNase/DNase untuk elusi, dan volume elusi yang direkomendasikan adalah 100μL.
Opsi 3.
Reagen ekstraksi yang direkomendasikan: Reagen Pelepasan Sampel Macro & Micro-Test. Sampel dahak perlu dicuci dengan menambahkan 1 mL larutan garam fisiologis ke endapan talus yang telah diolah seperti disebutkan di atas, disentrifugasi pada 13000 r/menit selama 5 menit, dan supernatan dibuang (sisakan 10-20 µL supernatan). Untuk koloni murni dan usap rektal, tambahkan 50 µL reagen pelepasan sampel langsung ke endapan talus yang telah diolah seperti disebutkan di atas, dan langkah selanjutnya harus diekstraksi sesuai dengan petunjuk penggunaan.
