Gen Resistensi Karbapenem (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nama Produk
Kit Deteksi Gen Resistensi Karbapenem HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR Fluoresensi)
Epidemiologi
Antibiotik karbapenem adalah antibiotik β-laktam atipikal dengan spektrum antibakteri terluas dan aktivitas antibakteri terkuat. Karena stabilitasnya terhadap β-laktamase dan toksisitasnya yang rendah, karbapenem telah menjadi salah satu obat antibakteri terpenting untuk pengobatan infeksi bakteri berat. Karbapenem sangat stabil terhadap β-laktamase spektrum luas (ESBL) yang dimediasi plasmid, kromosom, dan sefalosporinase yang dimediasi plasmid (enzim AmpC).
Saluran
| PCR-Campuran 1 | PCR-Campuran 2 | |
| KELUARGA | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Pengendalian Internal | Pengendalian Internal |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Parameter Teknis
| Penyimpanan | ≤-18℃ |
| Umur simpan | 12 bulan |
| Jenis Spesimen | Sputum, koloni murni, usap rektal |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103CFU/ml |
| Kekhususan | a) Kit mendeteksi referensi negatif perusahaan yang terstandarisasi, dan hasilnya memenuhi persyaratan referensi terkait. b) Hasil uji reaktivitas silang menunjukkan bahwa kit ini tidak terdapat reaksi silang dengan patogen pernapasan lain, seperti Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, Respiratory adenovirus, Enterococcus, atau sampel yang mengandung gen resistan obat lain CTX, mecA, SME, SHV, TEM, dan lain-lain. c) Anti-interferensi: Mucin, Minocycline, Gentamicin, Clindamycin, Imipenem, Cefoperazone, Meropenem, Ciprofloxacin Hydrochloride, Levofloxacin, Clavulanic acid, Roxithromycin dipilih untuk uji interferensi, dan hasilnya menunjukkan bahwa zat-zat pengganggu yang disebutkan di atas tidak mempunyai reaksi pengganggu terhadap deteksi gen resistensi karbapenem KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM, dan IMP. |
| Instrumen yang Berlaku | Sistem PCR Real-Time Applied Biosystems 7500 Sistem PCR Waktu Nyata QuantStudio®5 Sistem PCR Waktu Nyata SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Sistem PCR Waktu Nyata LightCycler®480 Sistem Deteksi PCR Waktu Nyata LineGene 9600 Plus (FQD-96A，Kota HangzhouTeknologi Bioer) MA-6000 Pengendali Siklus Termal Kuantitatif Waktu Nyata (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Sistem PCR Real-Time BioRad CFX96 Sistem PCR Real-Time BioRad CFX Opus 96 |
Alur Kerja
Pilihan 1.
Reagen ekstraksi yang direkomendasikan: Kit DNA/RNA Umum Makro & Mikro-Test (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (yang dapat digunakan dengan Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) dari Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. Tambahkan 200μL larutan garam normal ke dalam endapan talus. Langkah selanjutnya harus mengikuti petunjuk ekstraksi, dan volume elusi yang disarankan adalah100μL.
Pilihan 2.
Reagen ekstraksi yang direkomendasikan: Reagen Ekstraksi atau Pemurnian Asam Nukleat (YDP302) dari Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Ekstraksi harus dimulai sesuai dengan langkah 2 pada petunjuk penggunaan (tambahkan 200μL buffer GA ke dalam endapan talus, dan kocok hingga talus tersuspensi sempurna). Gunakan air bebas RNase/DNase untuk elusi, dan volume elusi yang direkomendasikan adalah 100μL.
Opsi 3.
Reagen ekstraksi yang direkomendasikan: Reagen Pelepasan Sampel Uji Makro & Mikro. Sampel sputum perlu dicuci dengan menambahkan 1 mL larutan garam fisiologis ke dalam endapan talus yang telah diolah, disentrifugasi pada kecepatan 13000 rpm selama 5 menit, dan supernatan dibuang (sisakan 10-20 µL supernatan). Untuk koloni murni dan usap rektal, tambahkan 50 µL reagen pelepas sampel langsung ke dalam endapan talus yang telah diolah, dan langkah selanjutnya harus diekstraksi sesuai petunjuk penggunaan.
